فایل ورد کامل مطالعه تخصصی درباره عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از گونه‌های مایکوئیدس و کاپریکولوم در گوساله‌ها و بزهای کشتار

توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد

 فایل ورد کامل مطالعه تخصصی درباره عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از گونه‌های مایکوئیدس و کاپریکولوم در گوساله‌ها و بزهای کشتار دارای ۱۸۸ صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد فایل ورد کامل مطالعه تخصصی درباره عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از گونه‌های مایکوئیدس و کاپریکولوم در گوساله‌ها و بزهای کشتار  کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه  و مراکز دولتی می باشد.

این پروژه توسط مرکز فایل ورد کامل مطالعه تخصصی درباره عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از گونه‌های مایکوئیدس و کاپریکولوم در گوساله‌ها و بزهای کشتار۲ ارائه میگردد

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی فایل ورد کامل مطالعه تخصصی درباره عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از گونه‌های مایکوئیدس و کاپریکولوم در گوساله‌ها و بزهای کشتار،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

---

بخشی از متن فایل ورد کامل مطالعه تخصصی درباره عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از گونه‌های مایکوئیدس و کاپریکولوم در گوساله‌ها و بزهای کشتار :

بررسی عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از مایکوپلاسما مایکوئیدس واریته مایکوئیدس و مایکوپلاسما کاپری کولوم واریته کاپری کولوم در گوساله‌ها و بزهای کشتار

کلاستر مایکوپلاسما مایکوئیدس در برگیرنده مهمترین پاتوژنهای تنفسی نشخوارکنندگان است که سالیانه، خسارات اقتصادی سنگینی بر صنعت دامپروری کشورهای جهان وارد می‌کند. اخیرا شیوعهای بازپدیدی از عفونتهای پلوروپنومونی نشخوارکنندگان در منطقه خاورمیانه گزارش شده است. در این شرایط تعیین وضعیت گله‌های کشور از نظر آلودگی به گونه‌های پاتوژن این کلاستر، از اهمیت خاصی برخوردار است. هنوز گزارشی از شناسایی و جداسازی گونه‌های درگیر از عفونت پلوروپنومونی در ایران بدست نیامده است. عدم برخورداری از خصوصیت پاتوگونومیک در نمونه‌های بالینی و دشواریهای فراوان جداسازی میکروارگانیسم، به ضرورت شناسایی و بکارگیری روشهای تشخیصی جایگزین افزوده است.

علاوه بر این، دستیابی به روشی کاربردی و سریع، در تشخیص عفونتهای تنفسی گله‌ها و تخمینی از وضعیت عفونت در ایران، مدنظر این تحقیق بوده است.

در این مطالعه‌، ۱۰۰ نمونه ریه با ضایعات مشکوک به عفونتهای تنفسی مایکوپلاسمایی از ۱۰۰ گله مشکوک (۵۰ گله گاو،۳۰ گله گوسفند،۲۰ گله بز) در اطراف کرمانشاه ، در سالهای ۱۳۸۶-۱۳۸۴ جمع آوری شدند. ضایعات ماکروسکوپی شامل کبدی شدن ریه‌ها با زخم‌های خاکستری و سفید(جامد شدن) و ظاهر منقوط با یا بدون فیبرین بودند. نمونه‌ها در محیط کشت PPLO براث و آگار کشت داده شدند.پس از پاساژهای متعدد،از ۲۳ گله مشکوک،تک کلونی تخم‌مرغی شکل مایکوپلاسما جداشد(۱۱ گله گاو،۸ گله گوسفند،۴ گله بز).

امادر واکنش. PCR63 گله عفونت مایکوپلاسمای تنفسی نشان دادند (۳۷ گله گاو، ۱۷ گله گوسفند، ۹ گله بز).

این امر، مبین این نکته است که علیرغم اینکه جداشدن عامل مایکوپلاسمایی از نمونه‌ها در محیط کشت، اساس تعیین وضعیت عفونت‌های مایکوپلاسمایی قلمداد می‌شود، اما سخت‌رشد بودن گونه‌های مورد مطالعه در محیط کشت و عدم دستیابی سریع به نتیجه، کارآیی این روش تشخیصی را در پایش متداول عفونت گله‌ها زیر سوال برده است.

علاوه بر این، بکاربردن آنتی بیوتیکهای متنوع در دوره درمان و از بین رفتن میکروارگانیسم در خلال جمع آوری نمونه، ‌نتایج رشد در محیط کشت مایکوپلاسما را دستخوش تغییر داده است.

از این رو،‌ استفاده از روشهای مولکولی PCR بعنوان یک روش کاربردی، حساس و سریع توصیه می‌شود. پس از استخراج ‌DNA نمونه‌ها به روش فنل کلروفورم و جدا کردن نمونه‌های آلوده به مایکوپلاسما از طریق PCR ، با استفاده از پرایمر اختصاصی کلاستر مایکوئیدس نمونه‌های مایکوپلاسمایی تحت واکنش PCR قرار گرفتند.

باند bp 548، تنها در نمونه کنترل ( سویه F38) دیده شد. به منظور کنترل روند واکنش، نمونه‌ها با پرایمر اختصاصی مایکوئیدس کلونی بزرگ و پرایمر اختصاصی آگالاکتیه، به طور جداگانه PCR شدند که نتیجه این آزمایش، یافته‌های آزمایش قبلی را تائید می‌کرد.

اگر چه این تحقیق نشان داد که عامل عفونتهای تنفسی مشکوک در نمونه‌های مورد مطالعه نمی‌تواند از گونه‌های کلاستر مایکوئیدس باشد، منتهی تخمین میزان عفونت در گله‌های مورد مطالعه، احتیاج به تحقیقات وسیعتر با جمع‌آوری تعداد نمونه‌های بیشتر در مطالعات بعدی دارد

فایل ورد کامل مطالعه تخصصی درباره عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از گونه‌های مایکوئیدس و کاپریکولوم در گوساله‌ها و بزهای کشتار
فهرست مطالب

الف- مقدمه۱

ب-چکیده۳

فصل اول:کلیات ۵

۱- تاریخچه ۶

۲- خصوصیات کلی مایکوپلاسما۶

۳- مقاومت مایکوپلاسماها ۸

۴- طبقه بندی مایکوپلاسماها ۹

۵- طبقه بندی کلاستر مایکوئیدس۱۲

۶- فیلوژنی۱۴

۷- ساختمان ۱۵

۱-۷-ساختمان مایکوپلاسما مایکوئیدس۱۵

۲-۷- ساختمان مایکوپلاسما کاپری کولوم ۱۷

۸- بیولوژی مولکولی۱۹

۹- توالی‌های تکراری۲۳

۱۰- پروتئینهای سطحی۲۵

۱۱- فاکتور حدت۳۰

۱۲- آنالیز پروتئین ۳۲

۱۳- طبقه بندی سویه‌ها ۳۴

۱۴- مشخصات گونه مایکوئیدس۳۵

۱۵- کشت و رشد گونه مایکوئیدس ۳۸

۱۶- کشت و رشد گونه کاپری کولوم ۴۱

۱-۱۶- محیط Thiacourt 41

۱۷- بیماری پلوروپنومونی واگیر گاوان۴۴

۱-۱۷- علائم بالینی ۴۵

۲-۱۷- علائم کالبدگشایی بیماری ۴۷

۳-۱۷- پاتوژنز ۵۰

۱-۳-۱۷- مکانیسمهای مقابله با دستگاه ایمنی۵۳

۴-۱۷- اختصاصیت میزبان۵۷

۵-۱۷- انتقال بیماری ۵۸

۶-۱۷- سیر همه گیری ۵۹

۱-۶-۱۷- مخزن۵۹

۲-۶-۱۷- راه انتقال۵۹

۷-۱۷- پیشگیری و کنترل۶۰

۱-۷-۱۷- اقدامات لازم برای حفاظت مناطق عاری از بیماری۶۱

۲-۷-۱۷- اقدامات لازم هنگام شیوع بیماری۶۲

۳-۷-۱۷- اقدامات لازم در مناطق آلوده بومی۶۳

۱۸- بیماری پلوروپنومونی واگیر بزان ۶۳

۱-۱۸- علائم بالینی ۶۴

۲-۱۸- علائم کالبد گشایی۶۶

۱۹- گونه مایکوپلاسما کاپریکولوم کاپریکولوم۶۹

۱-۱۹- سندروم MASKePs……………………………..70

۲-۱۹- علائم بالینی۷۱

۳-۱۹- علائم کالبد گشایی۷۱

۴-۱۹- سندروم آگالاکتیه واگیر۷۳

۲۰- گونه مایکوپلاسما کاپری ۷۳

۱-۲۰- بیماریزایی ۷۳

۲-۲۰- علائم کالبد گشایی۷۴

۲۱- سیر همه‌گیری۷۵

۱-۲۱-مخزن ۷۵

۲-۲۱-راه انتقال۷۶

۳-۲۱-جمعیت میزبان۷۷

۲۲-پیشگیری وکنترل۷۷

۱-۲۲- اقدامات لازم برای محافظت مناطق عاری از بیماری۷۷

۲-۲۲- اقدامات لازم هنگام شیوع بیماری۷۸

۳-۲۲- اقدامات لازم در مناطق آلوده بومی۷۸

۲۳-واکسن۷۹

۱-۲۳-واکسن MmmLC 79

۲-۲۳-واکسن Mccp 79

۳-۲۳-واکسن Mcc 79 79-اختصاصیت میزبان در کلاستر مایکوئیدس ۸۰

۲۵-تشخیص افتراقی۸۰

۱-۲۵-شناسایی عامل بیماری زا۸۱

۱-۱-۲۵-بررسی میکروسکوپیک اگزودای ریه از طریق تهیه اسمیر یا برش بافتی ۸۱

۲-۲۵- تشخیص آزمایشگاهی ۸۱

۱-۲-۲۵- روش کشت و جداسازی۸۱

۱-۱-۲-۲۵- انتخاب نمونه ها ۸۲

۲-۱-۲-۲۵- آماده سازی نمونه ها ۸۲

۳-۲۵- تستهای بیوشیمی۸۳

۴-۲۵- روشهای سرولوژی۸۵

۱-۴-۲۵- عوامل موثر در آزمایشات سرولوژی ۸۵

۲-۴-۲۵- تست مهاری رشد ۸۷

۳-۴-۲۵- تست ایمونو فلورسانس ۸۸

۴-۴-۲۵- تست رسوب ژلی ۸۸

۵-۴-۲۵- تست فیکساسیون کامپلمان ۸۹

۶-۴-۲۵- تست ممانعت از هماگلوتیناسیون۸۹

۷-۴-۲۵- تست آگلوتیناسیون لاتکس۹۰

۸-۴-۲۵- تست الیزای رقابتی۹۱

۹-۴-۲۵- سایر تستهای تشخیصی ۹۴

۵-۲۵ – مشکلات روشهای سنتی۹۴

۶-۲۵- تشخیص با استفاده از PCR95

فصل دوم: روش کار

۲۶- روش کار ۱۰۱

۱-۲۶- جمع آوری نمونه۱۰۱

۱-۱-۲۶- مواد لازم۱۰۱

۲-۱-۲۶- بخش جمع آوری نمونه۱۰۱

۳-۱-۲۶- نمونه برداری۱۰۳

۲-۲۶- کشت و جداسازی نمونه ها۱۰۴

۱-۲-۲۶- مواد لازم ۱۰۴

۲-۲-۲۶- طرز تهیه محیط کشت اختصاصی برای جداسازی مایکوپلاسمای نشخوار کنندگان ۱۰۶

۱-۲-۲-۲۶- مواد لازم ۱۰۶

۲-۲-۲-۲۶- روش تهیه محیط کشت۱۰۷

۳-۲۶- استخراج DNA مایکوپلاسما۱۰۹

۱-۳-۲۶- روش استخراج DNA از نمونه های ارسالی۱۰۹

۴-۲۶- فرایند PCR 110

۱-۴-۲۶- مواد لازم ۱۱۰

۲-۴-۲۶- آماده سازی مواد جهت واکنش PCR112

۱-۲-۴-۲۶- افزوده سازی DNA نمونه‌ها ۱۱۲

۲-۲-۴-۲۶- افزوده سازی DNA کلونیهای جدا شده۱۱۵

۳-۲-۴-۲۶- تهیه مخلوط اصلی اولیه۱۱۵

۳-۴-۲۶- پرایمرها۱۱۵

۴-۲۶- واکنشPCR……………..

۵-۲۶- تهیه ژل الکتروفورز ۱۱۸

۱-۵-۲۶- طرز تهیه محلول اتیدیوم برماید۱۱۹

۶-۲۶- الکتروفورز۱۲۱

۷-۲۶- رویت باندهای ایجاد شده ۱۲۲

فصل سوم: نتایج

۲۷- نتایج ۱۲۴

۱-۲۷- جداسازی۱۲۴

۱-۱-۲۷- بررسی عملکرد محیط کشت۱۲۴

۲-۱-۲۷- نتایج کشت نمونه های ارسالی ۱۲۴

۱-۲-۱-۲۷- نتایج روز پنجم ۱۲۵

۲-۲-۱-۲۷- نتایج روزهفتم تا دهم۱۲۵

۳-۲-۱-۲۷- نتایج روزپانزدهم۱۲۶

۲-۲۷- نتایج PCR 126

۱-۲-۲۷- نتایج PCR نمونه ها با پرایمر جنس ۱۲۶

۲-۲-۲۷- تائید کلونی های جدا شده۱۲۷

۳-۲-۲۷- نتایج PCR نمونه ها با پرایمر کلاستر مایکوئیدس۱۲۷

۴-۲-۲۷- نتایج PCR نمونه ها با پرایمر گونه آگالاکتیه۱۲۸

۵-۲-۲۷- نتایج PCR نمونه ها با پرایمر گونه مایکوئیدس کلونی بزرگ۱۲۹

۳-۲۷- نتایج کالبد گشایی۱۳۰

۱-۳-۲۷- معیار انتخاب ۱۳۰

فصل چهارم: بررسی نتایج

نمودارها ۱۳۱

فصل پنجم: بحث

۲۸- بحث ۱۳۹

۱-۲۸- ضایعات کالبد گشایی۱۳۹

۲-۲۸- میزان وقوع عفونت تنفسی مایکوپلاسما ۱۴۱

۳-۲۸- روش کشت۱۴۲

۴-۲۸- روش PCR 147

۵-۲۸- فراوانی گونه ها ۱۵۲

۲۹- خلاصه انگلیسی۱۵۹

۳۰- منابع ۱۶۰

فایل ورد کامل مطالعه تخصصی درباره عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از گونه‌های مایکوئیدس و کاپریکولوم در گوساله‌ها و بزهای کشتار
فهرست تصاویر:

تصویر شماره ۱: کلونی تخم مرغی شکل مایکوپلاسما پس از سومین ساب کالچر ۱۲۵

تصویر شماره ۲: آزمایش PCR برای تشخیص جنس مایکوپلاسما در نمونه ریه۱۲۷

تصویر شماره ۳: آزمایش PCR برای تشخیص کلاستر مایکوئیدس در نمونه ریه۱۲۸

تصویر شماره ۴: آزمایش PCR برای تشخیص گونه آگالاکتیه درنمونه ریه….. ۱۲۹

تصویر شماره ۵: آزمایش PCR برای تشخیص گونه مایکوئیدس مایکوئیدس کلونی بزرگ ۱۳۰

فایل ورد کامل مطالعه تخصصی درباره عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از گونه‌های مایکوئیدس و کاپریکولوم در گوساله‌ها و بزهای کشتار
فهرست جداول

جدول۱: طبقه بندی مایکوپلاسما ۱۱

جدول ۲: معرفی اعضا کلاستر مایکوئیدس و خصوصیات بیماریزایی آنها ۱۱

جدول ۳: احتیاجات غذایی برای رشد مایکوپلاسماهای کلاستر مایکوئیدس…………. ۳۹

جدول ۴ : مقادیر موردنیاز جهت تهیه مخلوط اصلی اولیه۱۱۲

جدول ۵: مواد مورد نیاز واکنش تکثیر ۱۱۴

جدول۶ : پرایمرهای استفاده شده در واکنش تکثیر ۱۱۶

جدول ۷ : برنامه واکنش پرایمرها ۱۱۸

جدول۸: : فرمول تهیه محیط TBE(5X)…………………….. 120

جدول۹: میزان اتیدیوم بروماید مصرفی جهت ساختن مقادیر متفاوت ژل۱۲۰

فایل ورد کامل مطالعه تخصصی درباره عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از گونه‌های مایکوئیدس و کاپریکولوم در گوساله‌ها و بزهای کشتار
فهرست نمودارها

نمودار شماره ۱: درصد مایکوپلاسمای جدا شده به روش کشت در عفونت تنفسی

گله‌های مورد مطالعه۱۳۲

نمودارشماره ۲: درصد حضور مایکوپلاسما درعفونت تنفسی گله‌های مورد

مطالعه به روشPCR 132

نمودار شماره۳ : مقایسه روشهای کشت و PCR در تشخیص مایکوپلاسما ی موجود در عفونت تنفسی گله‌های مورد مطالعه…………………….. ۱۳۳

نمودار شماره۴: مقایسه نتایج کشت وPCR نمونه‌ها در گله‌های مورد مطالعه (n=100) 133

نمودار شماره ۵: مقایسه نتایج کشت و PCR مایکوپلاسما در گاو (n=50) …… 134

نمودار شماره ۶: مقایسه نتایج کشت و PCR مایکوپلاسما در گله های گوسفند (n=30) 134

نمودار شماره ۷: مقایسه نتایج کشت و PCR در گله‌های بز (n=20)……………… 135

نمودار شماره۸: نمودار شماره ۸:مقایسه نتایج تشکیل کدورت در محیط براث و PCR مایکوپلاسما در گله‌های مورد مطالعه (n=100)… 135

نمودار شماره ۹: نمودار شماره۹:مقایسه نتایج ایجاد کدورت در محیط براث و جداسازی مایکوپلاسما در گله‌های مورد مطالعه (n=100) . 136

نمودار شماره ۱۰: نمودار شماره۱۰: مقایسه نتایج تشکیل کدورت در محیط براث و PCR مایکوپلاسما در گله‌های گاو(n=50)………………136

نمودار شماره ۱۱: نمودار شماره ۱۱:مقایسه نتایج تشکیل کدورت در محیط براث و PCR مایکوپلاسما در گله‌های بز (n=20)………………. 137

نمودار شماره۱۲: مقایسه نتایج تشکیل کدورت در محیط براث و PCR مایکوپلاسما در گله‌های گوسفند (n=30) ………………… 137